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    HPLC色譜純溶劑與檢測器的匹配和儲存注意事項

    發布時間:2018-03-26      點擊次數:1781
    HPLC色譜純溶劑與檢測器的匹配
    在使用紫外可見光檢測器時,需選用無紫外吸收特性的溶劑作流動相。樣品測定波長應當在溶劑紫外吸收波長上限以上,噪聲降至10-4~10-U,才能保證檢測的靈敏度,才能用于梯度洗脫。流動相溶劑在整個梯度范圍內互溶性要好,盡量減少溶劑折光指數對溶劑組成梯度的影響。
    HPLC色譜純溶劑折光指數的改變會導致紫外吸收度的變化,使紫外檢測器產生噪音和漂移。因此,當使用兩種或兩種以上溶劑做梯度時,其折光指數應該盡量接近,盡量減少溶劑紫外吸收度改變的影響。
    在使用示差折光檢測器時,應使流動相的折光指數與被測樣品的折光指數有盡可能大的差別,因為二者的折射率差別越大,檢測器的響應信號越大,檢測靈敏度越高。示差折光檢測器一般不用于梯度洗脫,這是因為隨溶劑組成的改變,流動相的折光指數也在改變,無法使基線穩定。
    使用熒光檢測器時,不能使用可熄滅、抑制或吸收熒光的溶劑作流動相。溶劑的極性和溶液的溫度對熒光強度有明顯的影響。增大溶劑的極性,導致熒光增強。通常熒光物質溶液的熒光效率和熒光強隨著溫度的升高而降低。此外,當樣品濃度較高時,易引起熒光猝滅效應和內濾效應,溶液濃度越大,該效應越顯著,溶液中的其它成分,特別是順磁性物質的存在,將使猝滅效應加劇。因此,在進行熒光檢測時,試樣要配成低于10-6g/mL濃度的溶液,要使用不含熒光物質的溶劑。

    HPLC色譜純溶劑儲存注意事項:
    儲存于陰涼、通風的庫房。遠離火種、熱源。庫溫不超過30℃,相對濕度不超過85%。保持容器密封。應與氧化劑、堿類、活性金屬粉末分開存放,切忌混儲。配備相應品種和數量的消防器材。儲區應備有泄漏應急處理設備和合適的收容材料。
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